उत्पादने

इतर पॉझिटिव्ह-स्ट्रँड आरएनए विषाणूंप्रमाणेच, टॉम्बस व्हायरसची प्रतिकृती मेम्ब्रेन-बाउंड व्हायरल रिप्लिकेस कॉम्प्लेक्स (VRC) द्वारे केली जाते.VRC मध्ये p92 व्हायरस-कोड केलेले RNA-आश्रित RNA पॉलिमरेझ (RdRp), व्हायरल p33 RNA चेपेरोन आणि अनेक सह-नियुक्त होस्ट प्रोटीन असतात.त्याच्या भाषांतरानंतर कार्यात्मक RdRp बनण्यासाठी, p92 प्रतिकृती प्रोटीन VRC मध्ये समाविष्ट केले जावे, त्यानंतर त्याचे सक्रियकरण केले जावे.टोमॅटो बुशी स्टंट व्हायरस (TBSV) RdRp च्या सक्रियतेसाठी विरघळणारे यजमान घटक आवश्यक असतात हे आम्ही सेल-फ्री यीस्ट अर्क-आधारित परीक्षणामध्ये यापूर्वी दाखवले आहे.या लेखात, आम्ही सेल्युलर हीट शॉक प्रोटीन 70 (Hsp70) हे N-टर्मिनली ट्रंकेटेड रीकॉम्बीनंट TBSV RdRp च्या सक्रियतेसाठी आवश्यक सह-नियुक्त होस्ट घटक म्हणून ओळखतो.याव्यतिरिक्त, Hsp70 फंक्शनचे लहान-रेणू-आधारित ब्लॉकिंग विट्रोमध्ये टॉम्बसव्हायरस RdRp द्वारे RNA संश्लेषण रोखते.शिवाय, आम्ही दर्शवितो की तटस्थ फॉस्फोलिपिड्स, म्हणजे फॉस्फेटिडायलेथॅनोलामाइन (पीई) आणि फॉस्फेटिडाइलकोलीन (पीसी), विट्रोमध्ये आरडीआरपी सक्रियता वाढवतात.याउलट, phosphatidylglycerol (PG) इन विट्रो RdRp सक्रियतेवर मजबूत आणि प्रबळ प्रतिबंधात्मक प्रभाव दर्शविते.आम्ही हे देखील दाखवतो की PE आणि PC RdRp-व्हायरल प्लस-स्ट्रँड RNA [(+)RNA] परस्परसंवाद उत्तेजित करतात, तर PG व्हायरल RNA ला RdRp ला जोडण्यास प्रतिबंध करते.tombusvirus RdRp सक्रियकरणातील विविध फॉस्फोलिपिड्सच्या उत्तेजक विरुद्ध प्रतिबंधात्मक भूमिकांवर आधारित, आम्ही प्रस्तावित करतो की लक्ष्यित सबसेल्युलर झिल्लीची लिपिड रचना टॉम्बुसव्हायरसद्वारे नवीन व्हीआरसी असेंब्लीचे नियमन करण्यासाठी वापरली जाऊ शकते संक्रमणाच्या दरम्यान. व्हायरस-कोडित RNA-आश्रित RNA-आश्रित. (RdRp), जे अनेक पॉझिटिव्ह-स्ट्रँड RNA व्हायरसच्या संक्रमित पेशींमध्ये व्हायरल आरएनए संततीचे संश्लेषण करण्यासाठी जबाबदार आहे, सुरुवातीला निष्क्रिय आहे.ही रणनीती सायटोसोलमध्ये व्हायरल आरएनए संश्लेषण टाळण्याची शक्यता आहे ज्यामुळे RNA-ट्रिगर केलेल्या सेल्युलर अँटीव्हायरल प्रतिसादांना वेगाने इंडक्शन होईल.मेम्ब्रेन-बाउंड प्रतिकृती कॉम्प्लेक्सच्या असेंब्ली दरम्यान, व्हायरल RdRp अपूर्णपणे समजलेल्या प्रक्रियेद्वारे सक्रिय होते ज्यामुळे RdRp RNA संश्लेषण करण्यास सक्षम होते.TBSV RdRp वापरून, आम्ही दाखवतो की को-ऑप्टेड सेल्युलर Hsp70 चेपेरोन आणि न्यूट्रल फॉस्फोलिपिड्स विट्रोमध्ये RdRp सक्रिय करणे सुलभ करतात.याउलट, phosphatidylglycerol (PG) चा इनव्हिट्रो RdRp सक्रियकरण आणि RdRp-व्हायरल RNA परस्परसंवादावर प्रभावशाली प्रतिबंधात्मक प्रभाव आहे, हे सूचित करते की RdRp च्या सभोवतालच्या झिल्लीयुक्त मायक्रोडोमेनचा RNA संश्लेषणाच्या क्षमतेवर मोठ्या प्रमाणात परिणाम होतो.अशाप्रकारे, व्हायरल RdRp चे सक्रियकरण संक्रमित पेशींमधील एकाधिक होस्ट घटकांवर अवलंबून असते.